WB實(shí)驗(yàn)代測

免疫印跡(immunoblotting)又稱蛋白質(zhì)印跡(Western blotting)，它是根據(jù)抗原抗體的特異性結(jié)合檢測復(fù)雜樣品中的某種蛋白的方法。該法是在凝膠電泳和固相免疫測定技術(shù)基礎(chǔ)上發(fā)展起來的一種新的免疫生化技術(shù)。由于免疫印跡具有SDS-PAGE 的高分辨力和固相免疫測定的高特異性和敏感性，現(xiàn)已成為蛋白分析的一種常規(guī)技術(shù)。免疫印跡常用于鑒定某種蛋白，并能對(duì)蛋白進(jìn)行定性和半定量分析。

Western blotting服務(wù)實(shí)驗(yàn)流程

u 細(xì)胞及組織蛋白質(zhì)抽提；

u 蛋白質(zhì)定量；

u 變性聚丙烯酰胺不連續(xù)凝膠電泳(SDS-PAGE)；

u 蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)膜；

u 膜的封閉；

u 一抗、二抗孵育；

u 結(jié)果檢測：化學(xué)發(fā)光法檢測，X 膠片曝光顯影；

u 數(shù)據(jù)分析；

代測說明：

1、有趨勢(shì)，不需做預(yù)實(shí)驗(yàn)。

2、沒有趨勢(shì)，要求做預(yù)實(shí)驗(yàn)。

3、WB檢測里包含了蛋白提取。

4、實(shí)驗(yàn)結(jié)束，返還膠圖。

5、一個(gè)指標(biāo)只能跑一張膜

WB實(shí)驗(yàn)代測的優(yōu)勢(shì)：

1、western免疫印跡是將蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)移到膜上，然后利用抗體進(jìn)行檢測。對(duì)已知表達(dá)蛋白，可用相應(yīng)抗體作為一抗進(jìn)行檢測，對(duì)新基因的表達(dá)產(chǎn)物，可通過融合部分的抗體檢測。